高速逆流色谱仪主要的应用领域介绍
点击次数:954 更新时间:2022-10-24
高速逆流色谱仪是近30年发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的高效快速分离分析技术。它既能用于微量组分的分析测定,又能用于大量的制备分离,灵活多样,其应用范围已超过其他各种分离方法,尤其在中药样品的分析分离方面更充分发挥它的特长,为推动该领域的进步和发展作出了巨大贡献。
高速逆流色谱仪是利用试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和固定相间的分配系数不.同,当试样随着流动相进入色谱柱中后,组分就在其中的两相间进行反复多次的分配(吸附一脱附一放出)由于固定相对各种组分的吸附能力不同(即保存作用不同),因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的柱长后,便彼此分离,顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流信号经放大后,在记录器上描绘出各组分的色谱峰。
目前,高速逆流色谱仪主要用于以下领域:
1、天然药物化学、中药化学。这是国内目前*泛的使用方法,为了弄清楚植物中的微量有效成分,开放手工色谱柱早已不够用了,几乎每个搞天然药化的实验室都至少有一台液相。
2、药物杂质纯化。由于合成工艺并不能做到*产率,往往伴有副产品,如何获得微量的杂质并确定结构和含量,这就得靠液相色谱。
3、蛋白纯化。相对于前者,蛋白纯化的起步要稍微晚一点,但是发展很迅速。同时,由于外国仪器厂家在这个领域的优势不算太大,目前国内也在这个领域加快发展,抢占地盘。
高压泵的一般压强为l.47~4.4X10Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质都能获得有效分离。